服務(wù)名稱: 神經(jīng)元尼氏染色實驗服務(wù)
規(guī)格: 樣本
價格： 35元
實驗周期： 3周
收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
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神經(jīng)元尼氏染色實驗服務(wù)
實驗技術(shù)簡介:
Franna Nissl (1860-1919) 1892年創(chuàng)立了Nissl染色法，以發(fā)現(xiàn)Nissl小體和Niss變性而聞名。常用的堿性染料有CresyI violet (焦油紫，甲.酚紫，克紫) ; thionine (硫堇); tolridine blue (甲苯胺藍(lán))等。尼氏體為嗜堿性物質(zhì)，又稱嗜染質(zhì)，光鏡下呈斑塊狀或細(xì)粒狀散在均勻分布。在一些大型的運動神經(jīng)元,尼氏體大而多，宛如虎皮花紋，又稱“虎斑"。電鏡下，尼氏體由大量平行排列的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和其間的游離核糖體組成。尼氏體是神經(jīng)元胞體細(xì)胞質(zhì)的特征性結(jié)構(gòu)之一，神經(jīng)元胞質(zhì)另外一 特征性結(jié)構(gòu)為神經(jīng)原纖維。
實驗技術(shù)原理:
正常的神經(jīng)細(xì)胞都含有一定數(shù)量的尼氏體， 它們主要分布于神經(jīng)細(xì)胞的漿中，形狀有大有小，如三角形，有的為橢圓形。這些物質(zhì)能被大部分的藍(lán)色染料所染色，這些染料如焦油堅牢紫(Cresyl fast violet)亞甲藍(lán)(methylene blue)甲苯胺藍(lán)(toluidine blue)硫董(thionin) 等鈄其染為藍(lán)色。但是，當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞受傷后，胞質(zhì)內(nèi)的尼氏體更可發(fā)生變化，嚴(yán)重的可消失。
實驗操作流程:
1、切片脫蠟至水
2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、無水酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠
實驗結(jié)果:
神經(jīng)細(xì)胞單位:紫-藍(lán)色細(xì)胞核:紫藍(lán)色尼氏體:紫深藍(lán)色
實驗操作流程:
1、切片脫蠟至水
2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、無水酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠
實驗注意事項:
客戶提供:
1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少于100mg;
2、培養(yǎng)細(xì)胞:通過細(xì)胞計數(shù)取不少于2x106個細(xì)胞于EP管，加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，混溝后保存于冰箱(-80°C, 避免反復(fù)凍融) ;
3、血液細(xì)胞標(biāo)本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5m生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,保存(-80°C可長期保存,避免反復(fù)凍融) ;
4、血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存(49C可保存15-20天，-80°C可長期保存，避免反復(fù)凍融) ;
5、石蠟切片，冰凍切片以及細(xì)胞爬片，涂片等。
6、樣本運輸:可選擇以下任何-種方式寄送標(biāo)本
組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護(hù)劑后，加冰袋寄送;
細(xì)胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出) ;
血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠(yuǎn)近2 -3天可到達(dá))。
交付標(biāo)準(zhǔn):
1、圖片;
2、完整項目報告(材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實驗結(jié)果)。
其他:
1、應(yīng)用酒精分化切片，要迅速，防止過度分化，將切片上的顏色全部脫掉。
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實驗代做：
客服01